核酸蛋白檢測儀的基本操作步驟
更新時間：2019-03-26 點擊次數(shù)：2403次
核酸蛋白檢測儀又稱紫外檢測儀，是液相色譜實驗中的一種紫外檢測器，配上層析樁、蠕動泵、部分收集器和記錄儀等就組成了一套完整的液相色譜系列裝置。核酸蛋白檢測儀可直接讀出光密度A值，且波長準(zhǔn)確度和重復(fù)性高、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個峰面積的相對峰面值，并能計算質(zhì)量相對的含量。是生物化學(xué)、分子生物學(xué)、基因工程、制藥、化工、農(nóng)業(yè)、食品以及醫(yī)院籌有關(guān)科研部門和生產(chǎn)單位在分離分析工作中不可缺手段。
核酸蛋白檢測儀是自動液相色譜分離層析儀中分離具有紫外吸收物質(zhì)(蛋白、核酸、多肽、酶)的種紫外檢測裝置，其原理是根據(jù)物質(zhì)（樣品）對紫外光有明顯吸收的特征，實現(xiàn)對樣品成份含量比對分析，以便進(jìn)行樣品蛋白、核酸物質(zhì)識別檢測和含量測定。可直接讀出光密度A值，且波長準(zhǔn)確度和重復(fù)性、單色性好、定性、定量分析中能直接記錄各個峰面積的相對峰面值，并能計算質(zhì)量相對的含量。
⑴在核酸蛋白檢測儀使用前，首先連接好所需配套儀器：層析柱、恒流泵、自動部分收集器、記錄儀(色譜工作站)。將各類插頭與插座接妥(220v電源)。
⑵按下檢測儀on電源開關(guān)，電源指示燈亮，說明整臺儀器電源開始工作，然后觀察光源指示燈，如果亮了，表示光源已開始工作，整臺儀器可進(jìn)入工作狀態(tài)，將檢測儀波長旋鈕旋到所需波長刻度上，把量程旋鈕撥到100%t檔(儀器預(yù)熱20分鐘，待基線平直后可加樣測試)。
⑶接通記錄儀電源開關(guān)，使電源開關(guān)撥到“通”指示燈亮。可根據(jù)記錄儀說明書調(diào)換不同的紙速度，用戶根據(jù)需要自行掌握，測量用10mv檔。此時記錄儀指針從零點開始向右移動某一刻度，調(diào)節(jié)檢測儀“光量”旋鈕使指針停留在記錄儀大約中間位置5mv左右數(shù)字顯示為50左右。。
⑷把核酸蛋白檢測儀進(jìn)樣口聚乙烯塑料管接到恒流泵上，使凝膠層析柱中緩沖液流過檢測儀(恒流泵流量視凝膠層析柱大小選1-3ml/min)。用“調(diào)零”調(diào)整吸光度a值為0(量程開關(guān)撥到100%t調(diào)節(jié)光量旋鈕，使記錄儀指針在10mv數(shù)字顯示為100，即透光率為100%。把量程開關(guān)撥到“0.0”檔，緩慢調(diào)節(jié)a調(diào)零旋鈕，使記錄儀指示在“o”位，檢測儀顯示為“o”)。
⑸以上步驟結(jié)束，析系統(tǒng)平衡后即可用洗脫液開始洗脫樣品，洗脫前再調(diào)一次吸光度0點。洗脫過程結(jié)束前不可再調(diào)節(jié)“調(diào)零”旋鈕。當(dāng)洗脫液流過檢測儀時，吸光度顯示大于零的數(shù)值，吸光度數(shù)值大小隨樣品的濃度而變化。洗脫完畢后吸光度顯示為稍大于零的數(shù)值。
⑹數(shù)字顯示吸光度和記錄儀自動繪制吸光度圖譜是兩個互相獨(dú)立的檢測系統(tǒng)，數(shù)字顯示吸光度與記錄儀所繪峰值大小沒有直接關(guān)系，不可互相換算。
